鼠抗地塞米松单克隆抗体

详细介绍

　　一、鼠抗地塞米松单克隆抗体原理

　　本试剂盒采用间接竞争ELISA方法定量检测样品中地塞米松的残留量。

　　二、鼠抗地塞米松单克隆抗体适用范围

　　定量检测鸡肉、猪肉等组织样品中地塞米松的残留。

　　三、试剂盒特点及技术指标

　　*检测时间：40min

　　*试剂盒灵敏度：0.2pb(?g/kg)

　　*试剂盒提供工作浓度标准品，使用更方便；

　　*试剂盒检测样本的灵敏度和准确度：

　　样本　检测下限　回收率

　　鸡肉  　1pb　   70%-120%

　　猪肉　　1pb　   70%-120%

　　试剂盒特异性：

　　药物名称　交叉反应率（%）

　　地塞米松　100%

　　地克珠利　＜1%

　　四、所需材料

　　仪器：微孔板酶标仪450nm/630nm、振荡器、离心机、刻度移液管（10mL）、洗耳球、天平（感量0.01g）、离心管（5mL,50mL）、漏斗、分液漏斗、烧杯、定量分析滤纸

　　微量移液器：单道1?L～10?L、10?L～100?L

　　多道50?L～300?L

　　试剂：甲醇、去离子水。

　　五、试剂盒组成

　　序号　组成部分　          96T装量

　　1　地塞米松酶标板      　 12×8孔

　　2　地塞米松标准品*6    　 6×1mL

　　3　地塞米松酶标物　       7mL

　　4　地塞米松抗体　         7mL

　　5　底物液A液　            7mL

　　6　底物液B液　            7mL

　　7　终止液　　             7mL

　　8　20×浓缩洗涤液         40mL

　　9  2×地塞米松样品稀释液  40mL

　　*注：A、B、C、D、E、F6个标准品浓度为：0ppb,0.2ppb,0.6ppb,1.8ppb,5.4ppb,16.2ppb，直接使用。

　　六：溶液配制

　　配液1:洗涤工作液

　　用去离子水将20×浓缩洗涤液按1:19体积比进行稀释。配好的洗涤工作液在4℃环境可保存一个月，用前一天取出回温。

　　配液2:1×地塞米松样品稀释液

　　用去离子水将2×地塞米松样品稀释液按1:1体积比进行稀释，用于样本的稀释，配好后在4℃环境可保存一个月，用前一天取出回温。

　　七、样本前处理

　　样本处理前须知：

　　①处理完的样品应及时进行下步检测，实验中必须使用一次性吸头，吸取不同试剂时要更换吸头。

　　②样本数目超过8个时推荐使用排枪加样。

　　鸡肉、猪肉

　　八、酶标免疫测定程序

　　将所需试剂从冷藏环境中取出，待其完全回升至室温（20～25℃）后方可使用。注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

　　按标准品和样品双孔平行的数量使用微孔。

　　加标准品/样品、酶、抗体：加标准品/样品50?L到对应的微孔中，加入地塞米松酶标物50?L/孔，再加入地塞米松抗体50?L/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置37℃环境中反应30min。

　　洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，

　　加入洗涤工作液250?L/孔，每次静置20s，甩去孔内液体，重复洗涤3次，zui后一次用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。

　　显色：加入底物液A液50?L/孔，再加底物

　　液B液50?L/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应10min。

　　测定：加入终止液50?L/孔，用酶标仪立即测定450nm处的吸光度值（建议用双波长450/630nm）检测。

　　九、结果判定

　　以标准品百分吸光率为纵坐标，以地塞米松标准品浓度（ppb）的半对数为横坐标，绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中地塞米松实际浓度。（详见试剂盒专业分析软件，以便进行大量样本的分析计算。）

　　十、注意事项

　　①洗板拍干后应立即进行下一步操作。

　　②反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。

　　③不使用过了有效期的试剂盒，不交换使用不同批号的试剂。

　　④0标准的吸光度（450/630nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。

　　⑤在加入底物液A液和底物液B液后，一般显色时间为10～15min即可。若颜色较浅，可延长反应时间到20min，反之则减短反应时间。

　　十一、贮藏条件及保存期

　　贮藏条件：2～8℃

　　保质期：12个月

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